期刊简介
本刊是全国性眼科专业学术期刊，国内外公开发行。本刊1993年创刊，季刊，每期64页。1998年改为双月刊出版。2000年始扩版增页，改为大16开，每期88页出版，2002年每期96页出版。1993年至2002年共出版10卷48期，3000多篇论文。《临床眼科杂志》注重报道临床应用方面的研究论文，以及临床实践中的经验总结，新技术、新疗法的创立和应用。力求做到普及与提高相结合，帮助临床医师解决实际问题，提高诊疗水平。努力提高我国眼科学学术水平，为增进学科的建设和发展服务。本刊报导的范围：有关眼科学临床应用方面的研究论著，临床经验介绍、技术改进、调查研究、病例报告、综述与讲座、学术动态以及书刊消息等。
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首页>临床眼科杂志
- 杂志名称：临床眼科杂志
- 主管单位：安徽医科大学；安徽眼科研究所
- 主办单位：安徽医科大学,安徽眼科研究所
- 国际刊号：1006-8422
- 国内刊号：34-1149/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：期刊收录：上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中), 维普收录(中)
P21-GFP融合基因表达载体的构建与在视网膜色素上皮细胞的表达定位
韩勇娟；曾水清；胡义珍；张海江
关键词：绿色荧光蛋白, p21, 基因表达, 视网膜色素上皮细胞
摘要：目的构建绿色荧光蛋白GFP-p21融合基因表达载体,并观察其在人视网膜色素上皮细胞中的表达及定位,为研究细胞周期蛋白激酶抑制因子p21对视网膜色素上皮细胞细胞周期的影响提供实验基础.方法以含有p21的全长序列的质粒为模板PCR扩增p21cDNA,应用基因重组技术与GFP基因融合,构建以绿色荧光蛋白GFP为报告基因的重组表达质粒pGFP-p21.利用脂质体转染体外培养的人视网膜色素上皮细胞,在活细胞状态下用荧光显微镜直接观察pGFP-p21融合蛋白在细胞中的分布和定位,用WesternBlot方法分析其蛋白的表达.结果①酶切、DNA测序均证实插入片断的正确性.②荧光显微镜观察结果显示在空载体pEGFP-C1转染组中,细胞内绿色荧光呈弥散分布;重组质粒pGFP-p21转染组中,绿色荧光主要集中在细胞核内.③WesternBlot证实了pGFP-P21融合基因的表达.结论成功的构建了pGFP-p21质粒.视网膜色素上皮细胞能高效表达pGFP-p21融合基因,且主要定位于细胞核内,与p21基因的表达方式相同.
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